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SYBR Green I(20×)定量PCR用
更新時(shí)間:2016-04-14   點(diǎn)擊次數(shù):2547次

SYBR Green I(20×)定量PCR

規(guī)格1ml

 

保存條件-20度,如果經(jīng)常使用,可放2-8度保存一周。

 

產(chǎn)品簡介

SYBR Green IdsDNA 結(jié)合熒光信號(hào)可增強(qiáng)800-1000倍。在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR Green I熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺?/span>DNA雙鏈后,熒光信號(hào)增強(qiáng),而不摻入鏈中的SYBR Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。

 

使用濃度對(duì)熒光PCR結(jié)果的影響

SYBR Green I熒光定量PCR的試驗(yàn)成功有很多因素,但是SYBR Green I的使用濃度是非常關(guān)鍵的因素,如果SYBR Green I的濃度過低會(huì)使熒光信號(hào)的變化降低。這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出;而在高濃度時(shí),將會(huì)抑制PCR反應(yīng)。降低PCR反應(yīng)效率。所以一般在使用

I時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化使用濃度。

我們提供的為20×的濃縮液,使用時(shí)可稀釋20-100倍,即使反應(yīng)的終濃度為1×到0.2×之間。

 

鎂離子濃度的影響

提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對(duì)PCR反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)時(shí),鎂離子濃度要比無SYBR Green I 的普通 PCR 反應(yīng)要高出 0.5 3mM

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