cst抗體的保存相關事項:
一、大部分cst收到后4℃短暫保存1-2周對抗體活性是沒有影響的。
如果cst抗體很快(1-2周)會使用,推薦在4℃保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。如果要長期保存則是在-20℃ or -80℃。zui關鍵的一點是要根據說明書推薦的方式來正確的保存抗體!但是,腹水形式的產品請在收到后立即凍起來!因為該類產品含有大量的蛋白酶,長期在4℃保存會導致抗體的降解!
二、收到cst抗體后請務必在12000rpm離心1分鐘后再打開管蓋進行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長離心時間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來)!
cst的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm離心1分鐘才能將附著在管壁或蓋內的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm離心也會導致離心不*,導致出現抗體的量不足的現象!
三、對于cst抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20℃ or -80℃ 。
對絕大多數抗體來說,保存在-20℃是*足夠了。沒有任何證據顯示保存在-80℃ 會有更多的好處!
分裝可以zui大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
分裝的量以一次實驗用完為好,zui少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發以及管壁吸附的影響。
復融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來!
抗體工作液應該當天配制當天用完,在4℃ 盡量不要超過1天。
避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上。
四、cst抗體抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要3-4周的時間,所以是在4℃的條件下來完成的。
4℃運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時Abcam抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸!
另外還需注意的是有些特殊的cst抗體要區別對待:
1.酶標抗體,不能凍存而應4度保存。凍融會降低酶活力以及影響抗體結合的能力。
2.偶聯型抗體,無論是跟熒光素,還是酶、生物素偶聯,都應該避光或者錫箔紙包裹保存。見光會降低偶聯抗體的活性。特別是熒光抗體,其對光很敏感,實驗期間必須全盤避光。
3.IgG3的同型抗體,其在復融時很容易形成多聚體,所以必須保存在4度。