Hoechst 33258 23491-45-4;昆明供應Hoechst 33258 23491-4
北京諾博萊德科技有限公司供應Hoechst 33258 23491-45-4量大優惠,咨詢 :
北京諾博萊德科技有限公司供應Hoechst 33258染色液 ;現貨供應Hoechst 33258染色液量大優惠,咨詢 : : 1215878164
Hoechst 33258,也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式為C25H24N6O·3HCl,分子量為533.88,CAS Number 23491-45-4。
Hoechst 33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。
Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色,或常規的DNA染色。
Hoechst 33258的zui大激發波長為346nm,zui大發射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結合后,zui大激發波長為352nm,zui大發射波長為461nm。
試劑盒組成
規格
保存條件
Hoechst 33258濃縮液(50X)1ml -20℃避光
Hoechst 33258稀釋液 50ml 2-8℃
此染色液做成濃縮液和稀釋液主要是為了使用方便,因為濃縮液才1ml,解凍起來很快,實際也可以一次將濃縮液都加入稀釋液中,混勻使用。但如果一次使用量比較少,使用次數比較多,是適當分裝一下,免得多次凍融。
使用說明:
Hoechst 33258染色液染色液的配制:將Hoechst 33258濃縮液取出解凍,輕輕混勻,短時間離心,根據使用量,按照1ml33258稀釋液加入20ul33258濃縮液的比例配制,即成Hoechst 33258染色液。此配好的染色液深度為10ug/ml,如果感覺染色顏色比較深,可適當的稀釋(用稀釋液)。此配好的染色液未用完可存放于-20℃避光。
1. 對于固定的細胞或組織:
a. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則*行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33258染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的Hoechst 33258染色。
b. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對于活細胞或組織:
a. 加入適當量Hoechst 33258染色液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液,對于96孔板一個孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細胞培養的溫度培養20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養液洗滌2-3次即可進行熒光檢測
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