凱杰Qiagen小樣本RNA提取試劑盒50T
74034 凱杰Qiagen小樣本RNA提取試劑盒50T RNeasy Plus Micro Kit ,產品介紹:產品品牌:Qiagen產品貨號:74034 產品名稱:小樣本RNA提取試劑盒 英文名稱:RNeasy Plus Micro Kit 產品規格:50T
凱杰Qiagen74034小樣本RNA提取試劑盒RNeasy Plus Micro Kit 50T
凱杰QIAGEN在生命科學研究、應用檢測、制藥、和分子診斷領域獲得成功和突破性進展。
74034 凱杰Qiagen小樣本RNA提取試劑盒50T RNeasy Plus Micro Kit ,產品介紹:
產品品牌:Qiagen
產品貨號:74034
產品名稱:小樣本RNA提取試劑盒
英文名稱:RNeasy Plus Micro Kit
產品規格:50T
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74034 凱杰Qiagen小樣本RNA提取試劑盒50T RNeasy Plus Micro Kit ,產品說明:
適用于 50 微量制備:RNeasy MinElute 離心柱、gDNA 去掉離心柱、收集管、載體 RNA、不含 RNase 的水和緩沖液
For 50 micropreps: RNeasy MinElute Spin Columns, gDNA Eliminator Spin Columns, Collection Tubes, Carrier RNA, RNase-Free Water and Buffers
特征
l 使用du特的gDNA消除柱或板高效去除gDNA(無需DNase)
l 使用快速簡單的提取方案在幾分鐘內獲得高質量的總RNA
l 無酚RNA分離
l 96孔形式的高通量處理
l 適用于實時 RT-PCR 和 RNA-seq 等敏感應用
產品詳情
RNeasy Plus 試劑盒是下一代 QIAGEN RNA 提取試劑盒,將高質量 RNA 純化與du特的 gDNA 消除柱或板的有效 gDNA 去除相結合。從各種培養細胞和易于裂解的組織中獲得高純度和高產量的總RNA。RNeasy Plus 微量試劑盒專為數量有限的樣品而設計,可分離出高達 45 μg 純總 RNA RNeasy Plus 迷你試劑盒可從單次提取中純化高達 100 μg 的總 RNA (>200 nt),并具有高效的 gDNA 去除功能。兩種試劑盒都可以在QIAcube Connect上實現自動化,并且可以使用RNAprotect組織試劑或Allprotect組織試劑方便地穩定樣品,并使用TissueRuptor II或TissueLyser II或LT系統(單獨提供)有效地破碎樣品。RNeasy Plus 96 試劑盒用于從 96 孔板中生長的培養細胞中高通量純化總 RNA。為了獲得*佳效果,建議將本產品與QIAvac 96系統一起使用。
RNeasy Plus Mini標準實驗方案也可以使用TRACKMAN Connected系統執行,該系統與Pipetman M Connected移液器配對,兩者都來自Gilson。TRACKMAN Connected 系統可指導研究人員完成 RNeasy Plus Mini 實驗方案,同時自動調整支持藍牙的 PIPETMAN M Connected 移液器設置。記錄協議執行的每個步驟,通過生成全面的運行報告來加速報告。
Performance
使用 RNeasy Plus 微型和迷你試劑盒從細胞和組織中提取 RNA,可實現高、可重復的 RNA 產量和高效的基因組 DNA 消除,適用于敏感應用.常規從組織和培養細胞中獲取安捷倫 RIN 值接近 10 的總 RNA。
RNeasy Plus 微量和迷你試劑盒還可富集 mRNA,因為大多數 RNA<200 個核苷酸(如 rRNA 和 tRNA)被排除在外。為了從培養的細胞中分離含有小RNA(例如miRNA)的總RNA,可以使用其他RNA分離方案,并在RNeasy Plus微型手冊中描述,并作為RNeasy Plus迷你試劑盒的單獨補充方案。
RNeasy Plus 96 試劑盒與多種細胞系兼容,可純化安捷倫 RIN 值接近 10 的高質量 RNA。通過試劑盒wan全去除基因組DNA可在高靈敏度應用中進行特異性轉錄本檢測,例如低豐度靶標的定量實時RT-PCR分析。此外,從102到106細胞的可靠RNA純化允許在寬動態范圍內進行實時RT-PCR定量
Principle
RNeasy Plus程序將QIAGEN用于雙鏈DNA選擇性結合的創新技術與成熟的RNeasy技術相結合。保證高質量RNA的高效純化,無需額外的DNA酶消化。純化的RNA即用型,非常適合對少量DNA污染敏感的下游應用,例如定量實時RT-PCR。
細胞和易于裂解的組織首先在高度變性的含異****的緩沖液RLT Plus中裂解和勻漿,該緩沖液可立即滅活RNA酶以確保分離完整的RNA。然后將裂解物通過gDNA消除器離心柱或gDNA消除器96板,該板與高鹽緩沖液結合使用,選擇性地有效地去除基因組DNA。加入乙醇以提供適當的RNA結合條件,并將樣品施加到RNeasy離心柱或96孔板上。這些專用色譜柱和 96 孔板含有硅膠膜,可特異性結合裂解細胞的 RNA。
對于脂肪和難以裂解的組織,建議使用 RNeasy Plus 通用試劑盒。為了從其他樣品類型中分離總RNA(包括miRNA),我們建議使用miRNeasy試劑盒。
Procedure
RNeasy Plus 微量試劑盒可從多達 5 x 10 5 個細胞或5 mg 組織中純化總 RNA,RNeasy Plus 迷你試劑盒可從多達 10 個7 個細胞或 30 mg 組織中分離總 RNA。短的工作流程可在不到 25 分鐘的時間內完成 RNA 分離和基因組 DNA 去除。首先裂解樣品并進行均質化。裂解物通過gDNA消除器離心柱,將乙醇添加到流通中,并將樣品施加到RNeasy離心柱上。RNA與膜結合,污染物被沖走。使用 RNeasy Plus 微量試劑盒在低至 14 μl 水中洗脫高質量 RNA,或使用 RNeasy Plus 迷你試劑盒在 30 μl 水中洗脫。
不同的實驗方案可用于不同的起始材料。該方案的主要區別在于樣品的裂解和均質化。一旦將樣品應用于gDNA消除器離心柱,實驗方案就相似了。該程序為mRNA提供了富集,因為大多數RNA<200個核苷酸(如rRNA和tRNA)被排除在外。
在 RLT Plus 緩沖液(隨 RNeasy Plus 迷你試劑盒隨附)中破碎和均質組織時,可能會出現過度起泡。通過在開始破碎和均質化之前將試劑DX(單獨提供)添加到緩沖液RLT Plus中,可以大大減少這種起泡。試劑DX已使用試劑盒進行了仔細測試,對RNA純度或下游應用沒有影響。
通過使用RNeasy 96板實現高通量RNA純化。在應用于RNeasy 96板之前,細胞裂解物首先通過gDNA消除器96板。gDNA 消除器 96 板使用離心機(離心機 4-16)方便地進行處理。使用 RNeasy 96 板進行 RNA 純化是手動的,包括 3 個簡單步驟:結合、洗滌和洗脫。使用離心機(離心機4-16和板轉子2 x 96)或真空(QIAvac 96)和離心機的組合可以快速方便地處理板。使用離心機處理板時,*多可使用2 x 10 6個細胞作為起始材料,而使用真空和離心機處理板時,*多可使用1 x 106個細胞。該程序為mRNA提供了富集,因為大多數RNA<200個核苷酸(如rRNA和tRNA)被排除在外??梢孕薷?span>RNeasy Plus程序,以允許從培養的細胞中純化含有小RNA(例如miRNA)的總RNA。
Applications
使用 RNeasy Plus 試劑盒純化的 RNA 非常適合對少量 DNA 污染敏感的下游應用,例如 RNA-seq 和定量實時 RT-PCR。純化的RNA也可用于其他應用。
RNeasy Plus 微量試劑盒適用于小樣品,包括:
l 激光顯微解剖冷凍切片
l 細針抽吸物
RNeasy Plus 96 試劑盒易于純化 96 孔格式的 RNA,非常適合以下領域的高通量基因表達分析:
l 藥物發現
l 生物醫學研究
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